貓TNF-α蛋白的原核表達及阻斷活性單克隆抗體的制備

摘要： 為制備針對貓TNF-α的具有阻斷活性的單克隆抗體，本研究基于可溶性貓TNF-α(sTNFα)基因成功構(gòu)建、表達及純化了重組質(zhì)粒pET-28a-sTNFα,并進一步對重組蛋白誘導(dǎo)表達的條件進行摸索和優(yōu)化，鑒定其生物活性；其次將貓TNF-α重組蛋白作為免疫原進行小鼠免疫、細胞融合、阻斷活性雜交瘤細胞的篩選和腹水制備，并對獲得的單克隆抗體進行鑒定。結(jié)果顯示，成功構(gòu)建了pET-28a-... （共7頁）